Νέα κατανόηση της θεραπείας πλάσματος πλούσιου σε αιμοπετάλια (PRP) – Μέρος II

Σύγχρονο PRP: «Κλινική PRP»

Τα τελευταία 10 χρόνια, το θεραπευτικό σχήμα του PRP έχει υποστεί μεγάλες αλλαγές.Μέσω της πειραματικής και κλινικής έρευνας, έχουμε πλέον μια καλύτερη κατανόηση της φυσιολογίας των αιμοπεταλίων και άλλων κυτταρικών φυσικών.Επιπλέον, αρκετές υψηλής ποιότητας συστηματικές αξιολογήσεις, μετα-αναλύσεις και τυχαιοποιημένες ελεγχόμενες δοκιμές έχουν δείξει την αποτελεσματικότητα της βιοτεχνολογίας PRP σε πολλούς ιατρικούς τομείς, όπως η δερματολογία, η καρδιοχειρουργική, η πλαστική χειρουργική, η ορθοπεδική χειρουργική, η διαχείριση του πόνου, οι παθήσεις της σπονδυλικής στήλης και η αθλητική ιατρική. .

Το τρέχον χαρακτηριστικό του PRP είναι η απόλυτη συγκέντρωση αιμοπεταλίων του, η οποία αλλάζει από τον αρχικό ορισμό του PRP (συμπεριλαμβανομένης της συγκέντρωσης αιμοπεταλίων υψηλότερη από την αρχική τιμή) σε περισσότερο από 1 × 10 6/μ L ή περίπου 5 φορές την ελάχιστη συγκέντρωση αιμοπεταλίων στα αιμοπετάλια από γραμμή βάσης.Στην εκτενή ανασκόπηση των Fadadu et al.Αξιολογήθηκαν 33 συστήματα και πρωτόκολλα PRP.Ο αριθμός αιμοπεταλίων του τελικού παρασκευάσματος PRP που παράγεται από ορισμένα από αυτά τα συστήματα είναι χαμηλότερος από αυτόν του ολικού αίματος.Ανέφεραν ότι ο παράγοντας αιμοπεταλίων του PRP αυξήθηκε έως και 0,52 με το κιτ απλής περιστροφής (Selphyl ®).Αντίθετα, διπλής περιστροφής EmCyte Genesis PurePRPII ® Η συγκέντρωση αιμοπεταλίων που παράγεται από τη συσκευή είναι η υψηλότερη (1,6 × 10 6 /μL) .

Προφανώς, οι μέθοδοι in vitro και τα ζώα δεν είναι το ιδανικό ερευνητικό περιβάλλον για επιτυχή μετατροπή σε κλινική πράξη.Ομοίως, η μελέτη σύγκρισης συσκευών δεν υποστηρίζει την απόφαση, επειδή δείχνουν ότι η συγκέντρωση αιμοπεταλίων μεταξύ των συσκευών PRP είναι πολύ διαφορετική.Ευτυχώς, μέσω τεχνολογίας και ανάλυσης που βασίζεται στην πρωτεομική, μπορούμε να βελτιώσουμε την κατανόησή μας για τις κυτταρικές λειτουργίες στο PRP που επηρεάζουν τα αποτελέσματα της θεραπείας.Προτού επιτευχθεί συναίνεση σχετικά με τα τυποποιημένα παρασκευάσματα και σκευάσματα PRP, το PRP θα πρέπει να ακολουθεί κλινικές συνθέσεις PRP για να προωθήσει σημαντικούς μηχανισμούς αποκατάστασης ιστών και προοδευτικά κλινικά αποτελέσματα.

Κλινική φόρμουλα PRP

Επί του παρόντος, το αποτελεσματικό κλινικό PRP (C-PRP) έχει χαρακτηριστεί ως μια σύνθετη σύνθεση αυτόλογων πολυκύτταρων συστατικών σε πλάσμα μικρού όγκου που λαμβάνεται από ένα μέρος του περιφερικού αίματος μετά από φυγοκέντρηση.Μετά τη φυγοκέντρηση, το PRP και τα μη αιμοπεταλιακά συστατικά του μπορούν να ανακτηθούν από τη συσκευή συγκέντρωσης σύμφωνα με διαφορετικές κυτταρικές πυκνότητες (από τις οποίες η πυκνότητα αιμοπεταλίων είναι η χαμηλότερη).

Χρήση PurePRP-SP ® Ο εξοπλισμός διαχωρισμού κυτταρικής πυκνότητας (EmCyte Corporation, Fort Myers, FL, USA) χρησιμοποιήθηκε για ολικό αίμα μετά από δύο διαδικασίες φυγοκέντρησης.Μετά την πρώτη διαδικασία φυγοκέντρησης, το συστατικό πλήρους αίματος διαχωρίστηκε σε δύο βασικές στιβάδες, το εναιώρημα πλάσματος αιμοπεταλίων (άπαχο) και το στρώμα ερυθρών αιμοσφαιρίων.Στο Α, το δεύτερο βήμα φυγοκέντρησης έχει ολοκληρωθεί.Ο πραγματικός όγκος PRP μπορεί να εξαχθεί για εφαρμογή από τον ασθενή.Η μεγέθυνση στο Β δείχνει ότι υπάρχει οργανωμένο καφέ στρώμα καθίζησης ερυθροκυττάρων πολλαπλών συστατικών (που αντιπροσωπεύεται από μπλε γραμμή) στο κάτω μέρος του εξοπλισμού, το οποίο περιέχει υψηλές συγκεντρώσεις αιμοπεταλίων, μονοκυττάρων και λεμφοκυττάρων, με βάση τη βαθμίδα πυκνότητας.Σε αυτό το παράδειγμα, σύμφωνα με το πρωτόκολλο παρασκευής C-PRP με φτωχά ουδετερόφιλα, θα εξαχθεί το ελάχιστο ποσοστό ουδετερόφιλων (<0,3%) και ερυθροκυττάρων (<0,1%).

Κοκκία αιμοπεταλίων

Στην πρώιμη κλινική εφαρμογή PRP, τα α-κοκκία είναι η πιο συχνά αναφερόμενη εσωτερική δομή των αιμοπεταλίων, επειδή περιέχουν παράγοντες πήξης, μεγάλο αριθμό PDGF και αγγειογόνους ρυθμιστές, αλλά έχουν μικρή θρομβογόνο λειτουργία.Άλλοι παράγοντες περιλαμβάνουν λιγότερο γνωστά συστατικά χημειοκίνης και κυτοκίνης, όπως ο παράγοντας αιμοπεταλίου 4 (PF4), η βασική πρωτεΐνη προ-αιμοπεταλίου, η P-σελεκτίνη (ενεργοποιητής της ιντεγκρίνης) και η χημειοκίνη RANTES (ρυθμίζεται με ενεργοποίηση, εκφράζοντας φυσιολογικά Τ κύτταρα και πιθανώς εκκρίνοντας).Η συνολική λειτουργία αυτών των ειδικών συστατικών κοκκίων αιμοπεταλίων είναι να προσλαμβάνουν και να ενεργοποιούν άλλα κύτταρα του ανοσοποιητικού ή να προκαλούν φλεγμονή των ενδοθηλιακών κυττάρων.

Πυκνά κοκκώδη συστατικά όπως το ADP, η σεροτονίνη, το πολυφωσφορικό, η ισταμίνη και η αδρεναλίνη χρησιμοποιούνται πιο έμμεσα ως ρυθμιστές της ενεργοποίησης των αιμοπεταλίων και της θρόμβωσης.Το πιο σημαντικό είναι ότι πολλά από αυτά τα στοιχεία έχουν τη λειτουργία της τροποποίησης των κυττάρων του ανοσοποιητικού.Η ADP των αιμοπεταλίων αναγνωρίζεται από τον υποδοχέα P2Y12ADP στα δενδριτικά κύτταρα (DC), αυξάνοντας έτσι την ενδοκύττωση του αντιγόνου.Το DC (κύτταρο που παρουσιάζει αντιγόνο) είναι πολύ σημαντικό για την έναρξη της ανοσοαπόκρισης των Τ κυττάρων και τον έλεγχο της προστατευτικής ανοσοαπόκρισης, η οποία συνδέει το έμφυτο ανοσοποιητικό σύστημα και το προσαρμοστικό ανοσοποιητικό σύστημα.Επιπλέον, η τριφωσφορική αδενοσίνη των αιμοπεταλίων (ATP) στέλνει σήματα μέσω του υποδοχέα Τ κυττάρων P2X7, οδηγώντας σε αυξημένη διαφοροποίηση των βοηθητικών κυττάρων CD4 Τ σε προφλεγμονώδη Τ βοηθητικά κύτταρα 17 (Th17).Άλλα συστατικά με πυκνά αιμοπετάλια σε κόκκους (όπως το γλουταμικό και η σεροτονίνη) επάγουν τη μετανάστευση των Τ κυττάρων και αυξάνουν τη διαφοροποίηση των μονοκυττάρων σε DC, αντίστοιχα.Στο PRP, αυτοί οι ανοσοτροποποιητές που προέρχονται από πυκνά σωματίδια είναι πολύ εμπλουτισμένοι και έχουν σημαντικές ανοσολογικές λειτουργίες.

Ο αριθμός των άμεσων και έμμεσων πιθανών αλληλεπιδράσεων μεταξύ αιμοπεταλίων και άλλων κυττάρων (υποδοχέων) είναι εκτεταμένος.Επομένως, η εφαρμογή του PRP στο τοπικό περιβάλλον παθολογικού ιστού μπορεί να προκαλέσει μια ποικιλία φλεγμονωδών επιδράσεων.

Συγκέντρωση αιμοπεταλίων

Το C-PRP θα πρέπει να περιέχει κλινικές δόσεις συμπυκνωμένων αιμοπεταλίων για να παράγει ευεργετικά θεραπευτικά αποτελέσματα.Τα αιμοπετάλια στο C-PRP θα πρέπει να διεγείρουν τον κυτταρικό πολλαπλασιασμό, τη σύνθεση μεσεγχυματικών και νευροτροφικών παραγόντων, να προάγουν τη μετανάστευση των χημειοτακτικών κυττάρων και να διεγείρουν την ανοσορυθμιστική δραστηριότητα, όπως φαίνεται στο σχήμα.

Τα ενεργοποιημένα αιμοπετάλια, η απελευθέρωση του PGF και τα μόρια προσκόλλησης μεσολαβούν σε μια ποικιλία κυτταρικών αλληλεπιδράσεων: χημειοταξία, κυτταρική προσκόλληση, μετανάστευση και κυτταρική διαφοροποίηση και ρυθμίζουν τις ρυθμιστικές δραστηριότητες του ανοσοποιητικού.Αυτές οι αλληλεπιδράσεις αιμοπεταλιακών κυττάρων-κυττάρων συμβάλλουν στην αγγειογένεση και τη φλεγμονώδη δραστηριότητα και τελικά διεγείρουν τη διαδικασία επιδιόρθωσης των ιστών.Συντομογραφίες: BMA: αναρρόφηση μυελού των οστών, EPC: ενδοθηλιακά προγονικά κύτταρα, EC: ενδοθηλιακά κύτταρα, 5-HT: 5-υδροξυτρυπταμίνη, RANTES: ενεργοποιημένη ρύθμιση της φυσιολογικής έκφρασης των κυττάρων Τ και πιθανή έκκριση, JAM: μορίου προσκόλλησης σύνδεσης csterlu: CD40L: 40 πρόσδεμα, SDF-1 α: παράγοντας-1 α, προερχόμενος από στρωματικά κύτταρα, CXCL: συνδετήρας χημειοκίνης (μοτίβο CXC), PF4: παράγοντας αιμοπεταλίων 4. Προσαρμοσμένο από Everts et al.

Ο Μαρξ ήταν το πρώτο άτομο που απέδειξε ότι η επούλωση των οστών και των μαλακών ιστών ενισχύθηκε και ο ελάχιστος αριθμός αιμοπεταλίων ήταν 1 × 10 6 /μL. Αυτά τα αποτελέσματα επιβεβαιώθηκαν σε μια μελέτη οσφυϊκής σύντηξης μέσω του μεσοσπονδύλιου τρήματος, όταν η δόση των αιμοπεταλίων ήταν μεγαλύτερη από 1,3 × Στα 106 αιμοπετάλια/μL, αυτή η μελέτη έδειξε περισσότερη σύντηξη.Επιπλέον, οι Giusti et al.Αποκαλύφθηκε 1,5 × Ο μηχανισμός επιδιόρθωσης ιστού σε δόση 109 απαιτεί αιμοπετάλια/mL για την πρόκληση λειτουργικής αγγειογένεσης μέσω της δραστηριότητας των ενδοθηλιακών κυττάρων.Στην τελευταία μελέτη, υψηλότερες συγκεντρώσεις μείωσαν το δυναμικό αγγειογένεσης των αιμοπεταλίων μέσα και γύρω από τα ωοθυλάκια.Επιπλέον, προηγούμενα δεδομένα έδειξαν ότι η δόση του PRP θα επηρέαζε επίσης τα αποτελέσματα της θεραπείας.Επομένως, προκειμένου να προκληθεί σημαντικά η αντίδραση αγγειογένεσης και να διεγείρεται ο κυτταρικός πολλαπλασιασμός και η κυτταρική μετανάστευση, το C-PRP θα πρέπει να περιέχει τουλάχιστον 7,5 σε μια φιάλη θεραπείας PRP 5 mL × 10 9 μπορεί να απελευθερώσει αιμοπετάλια.

Εκτός από την εξάρτηση από τη δόση, η επίδραση του PRP στην κυτταρική δραστηριότητα φαίνεται να εξαρτάται σε μεγάλο βαθμό από το χρόνο.Sophie et al.Αυτά τα αποτελέσματα υποδηλώνουν ότι η βραχυπρόθεσμη έκθεση σε προϊόντα λύσης ανθρώπινων αιμοπεταλίων μπορεί να διεγείρει τον πολλαπλασιασμό των οστικών κυττάρων και τη χημειοταξία.Αντίθετα, η μακροχρόνια έκθεση στο PRP θα οδηγήσει σε χαμηλότερα επίπεδα αλκαλικής φωσφατάσης και σχηματισμό μεταλλικών στοιχείων.

Ερυθρά αιμοσφαίρια

Τα ερυθρά αιμοσφαίρια είναι υπεύθυνα για τη μεταφορά οξυγόνου στους ιστούς και τη μεταφορά του διοξειδίου του άνθρακα από τους ιστούς στους πνεύμονες.Δεν έχουν πυρήνα και αποτελούνται από μόρια αίμης που συνδέονται με πρωτεΐνες.Τα συστατικά του σιδήρου και της αίμης στα ερυθρά αιμοσφαίρια προάγουν τον συνδυασμό οξυγόνου και διοξειδίου του άνθρακα.Γενικά, ο κύκλος ζωής των ερυθρών αιμοσφαιρίων είναι περίπου 120 ημέρες.Απομακρύνονται από την κυκλοφορία από τα μακροφάγα μέσω μιας διαδικασίας που ονομάζεται γήρανση των ερυθρών αιμοσφαιρίων.Τα ερυθρά αιμοσφαίρια σε δείγματα PRP μπορεί να καταστραφούν υπό συνθήκες διάτμησης (για παράδειγμα, χειρουργική αιμορραγίας ολικού αίματος, διαδικασία που προκαλείται από το ανοσοποιητικό σύστημα, οξειδωτικό στρες ή ανεπαρκές σχήμα συγκέντρωσης PRP).Επομένως, η κυτταρική μεμβράνη των ερυθρών αιμοσφαιρίων αποσυντίθεται και απελευθερώνει τοξική αιμοσφαιρίνη (Hb), μετρούμενη με αιμοσφαιρίνη χωρίς πλάσμα (PFH), αίμη και σίδηρο.].Η PFH και τα προϊόντα αποικοδόμησής της (αίμη και σίδηρος) οδηγούν από κοινού σε βλαβερές και κυτταροτοξικές επιδράσεις στους ιστούς, οδηγώντας σε οξειδωτικό στρες, απώλεια μονοξειδίου του αζώτου, ενεργοποίηση φλεγμονωδών οδών και ανοσοκαταστολή.Αυτές οι επιδράσεις τελικά θα οδηγήσουν σε δυσλειτουργία της μικροκυκλοφορίας, τοπική αγγειοσυστολή και αγγειακό τραυματισμό, καθώς και σοβαρή βλάβη των ιστών.

Το πιο σημαντικό πράγμα είναι ότι όταν το RBC που περιέχει C-PRP χορηγείται στον ιστό, θα προκαλέσει μια τοπική αντίδραση που ονομάζεται ερύπτωση, η οποία θα προκαλέσει την απελευθέρωση ενός αποτελεσματικού αναστολέα μετανάστευσης κυτοκίνης και μακροφάγων.Αυτή η κυτοκίνη αναστέλλει τη μετανάστευση μονοκυττάρων και μακροφάγων.Ασκεί ισχυρά προφλεγμονώδη σήματα στους περιβάλλοντες ιστούς, αναστέλλει τη μετανάστευση βλαστοκυττάρων και τον πολλαπλασιασμό των ινοβλαστών και οδηγεί σε σημαντική τοπική κυτταρική δυσλειτουργία.Ως εκ τούτου, είναι σημαντικό να περιοριστεί η μόλυνση με RBC στα παρασκευάσματα PRP.Επιπλέον, ο ρόλος των ερυθρών αιμοσφαιρίων στην αναγέννηση των ιστών δεν έχει ποτέ προσδιοριστεί.Η επαρκής διαδικασία φυγοκέντρησης και προετοιμασίας του C-PRP συνήθως μειώνει ή ακόμα και εξαλείφει την παρουσία ερυθρών αιμοσφαιρίων, αποφεύγοντας έτσι τις δυσμενείς συνέπειες της αιμόλυσης και της πολυκυτταραιμίας.

Λευκοκύτταρα σε C-PRP

Η παρουσία λευκών αιμοσφαιρίων στα σκευάσματα PRP εξαρτάται από τον εξοπλισμό θεραπείας και το σχήμα προετοιμασίας.Σε εξοπλισμό PRP με βάση το πλάσμα, τα λευκά αιμοσφαίρια εξαλείφονται πλήρως.Ωστόσο, τα λευκά αιμοσφαίρια συγκεντρώθηκαν σημαντικά στο παρασκεύασμα PRP της καφέ στιβάδας καθίζησης ερυθροκυττάρων.Λόγω των μηχανισμών άμυνας του ανοσοποιητικού και του ξενιστή, τα λευκά αιμοσφαίρια επηρεάζουν σε μεγάλο βαθμό την εσωτερική βιολογία των οξειών και χρόνιων καταστάσεων των ιστών.Αυτά τα χαρακτηριστικά θα συζητηθούν περαιτέρω παρακάτω.Επομένως, η παρουσία ειδικών λευκοκυττάρων στο C-PRP μπορεί να προκαλέσει σημαντικές επιδράσεις στα κύτταρα και στους ιστούς.Πιο συγκεκριμένα, διαφορετικά συστήματα καφέ-κίτρινου στρώματος καθίζησης ερυθροκυττάρων PRP χρησιμοποιούν διαφορετικά σχήματα προετοιμασίας, παράγοντας έτσι διαφορετική αναλογία ουδετερόφιλων, λεμφοκυττάρων και μονοκυττάρων στο PRP.Τα ηωσινόφιλα και τα βασεόφιλα δεν μπορούν να μετρηθούν σε παρασκευάσματα PRP επειδή οι κυτταρικές τους μεμβράνες είναι πολύ εύθραυστες για να αντέχουν στις φυγόκεντρες δυνάμεις επεξεργασίας.

Ουδετερόφιλα

Τα ουδετερόφιλα είναι απαραίτητα λευκοκύτταρα σε πολλές θεραπευτικές οδούς.Αυτές οι οδοί συνδυάζονται με αντιμικροβιακές πρωτεΐνες που υπάρχουν στα αιμοπετάλια για να σχηματίσουν ένα πυκνό φράγμα έναντι των διεισδυτικών παθογόνων.Η ύπαρξη ουδετερόφιλων προσδιορίζεται σύμφωνα με τον στόχο θεραπείας του C-PRP.Αυξημένα επίπεδα φλεγμονής ιστού μπορεί να απαιτούνται στη βιοθεραπεία PRP φροντίδας χρόνιου τραύματος ή σε εφαρμογές που στοχεύουν στην ανάπτυξη ή την επούλωση των οστών.Είναι σημαντικό ότι επιπρόσθετες λειτουργίες ουδετερόφιλων έχουν βρεθεί σε αρκετά μοντέλα, τονίζοντας τον ρόλο τους στην αγγειογένεση και την επιδιόρθωση των ιστών.Ωστόσο, τα ουδετερόφιλα μπορούν επίσης να προκαλέσουν επιβλαβείς επιπτώσεις, επομένως δεν είναι κατάλληλα για ορισμένες εφαρμογές.Οι Zhou και Wang απέδειξαν ότι η χρήση PRP πλούσιου σε ουδετερόφιλα μπορεί να οδηγήσει σε αύξηση της αναλογίας κολλαγόνου τύπου ΙΙΙ προς κολλαγόνο τύπου Ι, επιδεινώνοντας έτσι την ίνωση και μειώνοντας την αντοχή του τένοντα.Άλλα επιβλαβή χαρακτηριστικά που προκαλούνται από τα ουδετερόφιλα είναι η απελευθέρωση φλεγμονωδών κυτοκινών και μεταλλοπρωτεϊνασών μήτρας (MMPs), που μπορούν να προάγουν τη φλεγμονή και τον καταβολισμό όταν εφαρμόζονται στους ιστούς.

Λευκομονοκύτταρο

Στο C-PRP, τα μονοπύρηνα Τ και Β λεμφοκύτταρα είναι πιο συγκεντρωμένα από οποιαδήποτε άλλα λευκά αιμοσφαίρια.Σχετίζονται στενά με την κυτταροτοξική προσαρμοστική ανοσία που προκαλείται από κύτταρα.Τα λεμφοκύτταρα μπορούν να πυροδοτήσουν κυτταρικές αντιδράσεις για να καταπολεμήσουν τη μόλυνση και να προσαρμοστούν στους εισβολείς.Επιπλέον, οι κυτοκίνες που προέρχονται από Τ-λεμφοκύτταρα (ιντερφερόνη-γ [IFN-γ] και η ιντερλευκίνη-4 (IL-4) ενισχύουν την πόλωση των μακροφάγων. Verassar et al. Έχει αποδειχθεί ότι τα συμβατικά Τ λεμφοκύτταρα μπορούν έμμεσα να προάγουν την επούλωση των ιστών σε το μοντέλο του ποντικού ρυθμίζοντας τη διαφοροποίηση των μονοκυττάρων και των μακροφάγων.

Μονοκύτταρα – πολυδύναμο επισκευαστικό κύτταρο

Σύμφωνα με τη συσκευή παρασκευής PRP που χρησιμοποιείται, τα μονοκύτταρα μπορεί να προεξέχουν ή να μην υπάρχουν στη φιάλη θεραπείας PRP.Δυστυχώς, η απόδοση και η ικανότητα αναγέννησής τους σπάνια συζητούνται στη βιβλιογραφία.Επομένως, λίγη προσοχή δίνεται στα μονοκύτταρα στη μέθοδο παρασκευής ή στην τελική φόρμουλα.Η ομάδα μονοκυττάρων είναι ετερογενής, προέρχεται από προγονικά κύτταρα του μυελού των οστών και μεταφέρεται στους περιφερικούς ιστούς μέσω της οδού αιμοποιητικών βλαστοκυττάρων σύμφωνα με τη διέγερση του μικροπεριβάλλοντος.Κατά τη διάρκεια της ομοιόστασης και της φλεγμονής, τα κυκλοφορούντα μονοκύτταρα εγκαταλείπουν την κυκλοφορία του αίματος και στρατολογούνται σε τραυματισμένους ή υποβαθμισμένους ιστούς.Μπορούν να δράσουν ως μακροφάγα (Μ Φ) τελεστικά κύτταρα ή προγονικά κύτταρα.Τα μονοκύτταρα, τα μακροφάγα και τα δενδριτικά κύτταρα αντιπροσωπεύουν το μονοπύρηνο φαγοκυτταρικό σύστημα (MPS). Ένα τυπικό χαρακτηριστικό του MPS είναι η πλαστικότητα του προτύπου γονιδιακής έκφρασης και η λειτουργική επικάλυψη μεταξύ αυτών των τύπων κυττάρων.Σε εκφυλισμένους ιστούς, μόνιμοι μακροφάγοι, τοπικά δρώντες αυξητικοί παράγοντες, προφλεγμονώδεις κυτοκίνες, αποπτωτικά ή νεκρωτικά κύτταρα και μικροβιακά προϊόντα εκκινούν τα μονοκύτταρα να διαφοροποιηθούν σε κυτταρικές ομάδες MPS.Ας υποθέσουμε ότι όταν τα μονοκύτταρα υψηλής απόδοσης που περιέχουν C-PRP εγχέονται στο τοπικό μικροπεριβάλλον της νόσου, τα μονοκύτταρα είναι πιθανό να διαφοροποιηθούν σε Μ Φ για να προκαλέσουν σημαντικές κυτταρικές αλλαγές.

Από μονοκύτταρο σε Μ Φ Στη διαδικασία μετασχηματισμού, ειδικός Φαινότυπος Μ Φ.Τα τελευταία δέκα χρόνια έχει αναπτυχθεί ένα μοντέλο που ενσωματώνει το Μ Φ Ο πολύπλοκος μηχανισμός ενεργοποίησης περιγράφεται ως πόλωση δύο αντίθετων καταστάσεων: Μ Φ Φαινότυπος 1 (Μ Φ 1, Κλασική ενεργοποίηση) και Μ Φ Φαινότυπος 2 (Μ Φ 2, εναλλακτική ενεργοποίηση).Το Μ Φ 1 χαρακτηρίζεται από φλεγμονώδη έκκριση κυτοκίνης (IFN-γ) και μονοξείδιο του αζώτου για την παραγωγή αποτελεσματικού μηχανισμού θανάτωσης παθογόνων.Μ Φ Ο φαινότυπος παράγει επίσης αγγειακό ενδοθηλιακό αυξητικό παράγοντα (VEGF) και αυξητικό παράγοντα ινοβλαστών (FGF).Μ Φ Ο φαινότυπος αποτελείται από αντιφλεγμονώδη κύτταρα με υψηλή φαγοκυττάρωση.Μ Φ 2 Παράγουν συστατικά εξωκυτταρικής μήτρας, αγγειογένεση και χημειοκίνες και ιντερλευκίνη 10 (IL-10).Εκτός από την άμυνα των παθογόνων, το Μ Φ μπορεί επίσης να μειώσει τη φλεγμονή και να προωθήσει την επισκευή των ιστών.Αξιοσημείωτο είναι ότι το Μ Φ 2 έχει υποδιαιρεθεί σε Μ in vitro Φ 2a、Μ Φ 2b και Μ Φ 2. Εξαρτάται από το ερέθισμα.Η in vivo μετάφραση αυτών των υποτύπων είναι δύσκολη επειδή ο ιστός μπορεί να περιέχει μικτές Ομάδες Μ Φ.Είναι ενδιαφέρον ότι με βάση τα τοπικά περιβαλλοντικά σήματα και τα επίπεδα IL-4, το προφλεγμονώδες M Φ 1 μπορεί να μετατραπεί για να προάγει την επιδιόρθωση M Φ 2. Από αυτά τα δεδομένα, είναι λογικό να υποθέσουμε ότι υπάρχουν υψηλές συγκεντρώσεις μονοκυττάρων και παρασκευασμάτων M Φ C-PRP μπορεί να συμβάλλουν στην καλύτερη επισκευή των ιστών επειδή έχουν αντιφλεγμονώδη επιδιόρθωση ιστού και ικανότητες μεταγωγής κυτταρικού σήματος.

Συγχυσμένος ορισμός του κλάσματος λευκών αιμοσφαιρίων στο PRP

Η παρουσία λευκών αιμοσφαιρίων σε φιάλες θεραπείας PRP εξαρτάται από τη συσκευή παρασκευής PRP και μπορεί να έχει σημαντικές διαφορές.Υπάρχουν πολλές διαφωνίες σχετικά με την ύπαρξη λευκοκυττάρων και τη συμβολή τους σε διαφορετικά προϊόντα υπο-PRP (όπως PRGF, P-PRP, LP-PRP, LR-PRP, P-PRF και L-PRF) Σε μια πρόσφατη ανασκόπηση, έξι τυχαιοποιημένες ελεγχόμενες δοκιμές (επίπεδο αποδεικτικών στοιχείων 1) και τρεις προοπτικές συγκριτικές μελέτες (επίπεδο αποδεικτικών στοιχείων 2) περιελάμβαναν 1055 ασθενείς, υποδεικνύοντας ότι το LR-PRP και το LP-PRP είχαν παρόμοια ασφάλεια.Ο συγγραφέας κατέληξε στο συμπέρασμα ότι η ανεπιθύμητη ενέργεια του PRP μπορεί να μην σχετίζεται άμεσα με τη συγκέντρωση των λευκών αιμοσφαιρίων.Σε άλλη μελέτη, το LR-PRP δεν άλλαξε τη φλεγμονώδη ιντερλευκίνη (IL-1) στην ΟΑ γόνατος β, IL-6, IL-8 και IL-17).Αυτά τα αποτελέσματα υποστηρίζουν την άποψη ότι ο ρόλος των λευκοκυττάρων στη βιολογική δραστηριότητα του PRP in vivo μπορεί να προέρχεται από τη διασταύρωση μεταξύ αιμοπεταλίων και λευκοκυττάρων.Αυτή η αλληλεπίδραση μπορεί να προάγει τη βιοσύνθεση άλλων παραγόντων (όπως το λιποξυγόνο), οι οποίοι μπορούν να αντισταθμίσουν ή να προάγουν την υποχώρηση της φλεγμονής.Μετά την αρχική απελευθέρωση των φλεγμονωδών μορίων (αραχιδονικό οξύ, λευκοτριένιο και προσταγλανδίνη), το λιποξυγόνο Α4 απελευθερώνεται από τα ενεργοποιημένα αιμοπετάλια για την πρόληψη της ενεργοποίησης των ουδετερόφιλων.Σε αυτό το περιβάλλον είναι που ο φαινότυπος Μ Φ από Μ Φ 1 αλλάζει σε Μ Φ 2. Επιπλέον, υπάρχουν αυξανόμενες ενδείξεις ότι τα κυκλοφορούντα μονοπύρηνα κύτταρα μπορούν να διαφοροποιηθούν σε μια ποικιλία τύπων μη φαγοκυτταρικών κυττάρων λόγω της πολυδύναμής τους.

Ο τύπος του PRP θα επηρεάσει την καλλιέργεια MSC.Σε σύγκριση με τα καθαρά δείγματα PRP ή PPP, το LR-PRP μπορεί να προκαλέσει σημαντικά υψηλότερο πολλαπλασιασμό των MSCs που προέρχονται από μυελό των οστών (BMMSCs), με ταχύτερη απελευθέρωση και καλύτερη βιολογική δραστηριότητα PGF.Όλα αυτά τα χαρακτηριστικά ευνοούν την προσθήκη μονοκυττάρων στη φιάλη θεραπείας PRP και την αναγνώριση της ανοσοτροποποιητικής τους ικανότητας και της δυνατότητας διαφοροποίησης.

Συγγενής και προσαρμοστική ανοσολογική ρύθμιση του PRP

Η πιο διάσημη φυσιολογική λειτουργία των αιμοπεταλίων είναι ο έλεγχος της αιμορραγίας.Συσσωρεύονται στο σημείο της βλάβης των ιστών και στα κατεστραμμένα αιμοφόρα αγγεία.Αυτά τα συμβάντα προκαλούνται από την έκφραση ιντεγκρινών και σελεκτινών που διεγείρουν την προσκόλληση και τη συσσώρευση των αιμοπεταλίων.Το κατεστραμμένο ενδοθήλιο επιδεινώνει περαιτέρω αυτή τη διαδικασία και το εκτεθειμένο κολλαγόνο και άλλες πρωτεΐνες υποενδοθηλιακής μήτρας προάγουν τη βαθιά ενεργοποίηση των αιμοπεταλίων.Σε αυτές τις περιπτώσεις, έχει αποδειχθεί ο σημαντικός ρόλος της αλληλεπίδρασης μεταξύ του παράγοντα von Willebrand (vWF) και της γλυκοπρωτεΐνης (GP), ιδιαίτερα της GP-Ib.Μετά την ενεργοποίηση των αιμοπεταλίων, τα α-、 Πυκνά, λυσοσώματα και Τ-κοκκία αιμοπεταλίων ρυθμίζουν την εξωκυττάρωση και απελευθερώνουν το περιεχόμενό τους στο εξωκυτταρικό περιβάλλον.

Μόριο προσκόλλησης αιμοπεταλίων

Προκειμένου να κατανοήσουμε καλύτερα τον ρόλο του PRP σε φλεγμονώδεις ιστούς και αιμοπετάλια στην ανοσολογική απόκριση, θα πρέπει να κατανοήσουμε πώς διαφορετικοί υποδοχείς επιφάνειας αιμοπεταλίων (ιντεγκρίνες) και μόρια προσκόλλησης σύνδεσης (JAM) και κυτταρικές αλληλεπιδράσεις μπορούν να ξεκινήσουν κρίσιμες διαδικασίες στην έμφυτη και προσαρμοστική ανοσία.

Οι ιντεγκρίνες είναι μόρια προσκόλλησης της κυτταρικής επιφάνειας που βρίσκονται σε διάφορους τύπους κυττάρων και εκφράζονται σε μεγάλες ποσότητες στα αιμοπετάλια.Οι ιντεγκρίνες περιλαμβάνουν a5b1, a6b1, a2b1 LFA-2, (GPIa/IIa) και aIIbb3 (GPIIb/IIIa).Συνήθως, υπάρχουν σε μια στατική και χαμηλής συγγένειας κατάσταση.Μετά την ενεργοποίηση, μεταπηδούν στην κατάσταση υψηλής συγγένειας δέσμευσης συνδέτη.Οι ιντεγκρίνες έχουν διαφορετικές λειτουργίες στα αιμοπετάλια και συμμετέχουν στην αλληλεπίδραση των αιμοπεταλίων με διάφορους τύπους λευκών αιμοσφαιρίων, ενδοθηλιακά κύτταρα και εξωκυτταρική μήτρα.Επιπλέον, το σύμπλοκο GP-Ib-V-IX εκφράζεται στη μεμβράνη των αιμοπεταλίων και είναι ο κύριος υποδοχέας για δέσμευση με νοη vWF.Αυτή η αλληλεπίδραση μεσολαβεί στην αρχική επαφή μεταξύ των αιμοπεταλίων και των εκτεθειμένων υποενδοθηλιακών δομών.Η ιντεγκρίνη αιμοπεταλίων και το σύμπλοκο GP σχετίζονται με διάφορες φλεγμονώδεις διεργασίες και παίζουν σημαντικό ρόλο στο σχηματισμό συμπλόκου αιμοπεταλίων-λευκοκυττάρων.Συγκεκριμένα, η ιντεγκρίνη aIIbb3 είναι απαραίτητη για να σχηματιστεί ένα σταθερό σύμπλοκο συνδυάζοντας ινωδογόνο με υποδοχέα αντιγόνου μακροφάγου 1 (Mac-1) στα ουδετερόφιλα.

Τα αιμοπετάλια, τα ουδετερόφιλα και τα αγγειακά ενδοθηλιακά κύτταρα εκφράζουν συγκεκριμένα μόρια κυτταρικής προσκόλλησης, που ονομάζονται σελεκτίνη.Υπό φλεγμονώδεις συνθήκες, τα αιμοπετάλια εκφράζουν Ρ-σελεκτίνη και ουδετερόφιλη L-σελεκτίνη.Μετά την ενεργοποίηση των αιμοπεταλίων, η Ρ-σελεκτίνη μπορεί να συνδεθεί με τον συνδέτη PSGL-1 που υπάρχει στα ουδετερόφιλα και στα μονοκύτταρα.Επιπλέον, η δέσμευση PSGL-1 ξεκινά την ενδοκυτταρική αντίδραση καταρράκτη σήματος, η οποία ενεργοποιεί τα ουδετερόφιλα μέσω της ιντεγκρίνης ουδετερόφιλων Mac-1 και του αντιγόνου 1 που σχετίζεται με τη λειτουργία των λεμφοκυττάρων (LFA-1).Το ενεργοποιημένο Mac-1 συνδέεται με το GPIb ή το GPIIb/IIIa στα αιμοπετάλια μέσω του ινωδογόνου, σταθεροποιώντας έτσι την αλληλεπίδραση μεταξύ ουδετερόφιλων και αιμοπεταλίων.Επιπλέον, το ενεργοποιημένο LFA-1 μπορεί να συνδυαστεί με το μόριο διακυτταρικής προσκόλλησης αιμοπεταλίων 2 για περαιτέρω σταθεροποίηση του συμπλέγματος ουδετερόφιλων-αιμοπεταλίων για την προώθηση της μακροχρόνιας προσκόλλησης με τα κύτταρα.

Τα αιμοπετάλια και τα λευκοκύτταρα παίζουν βασικό ρόλο στις έμφυτες και προσαρμοστικές ανοσολογικές αποκρίσεις

Το σώμα μπορεί να αναγνωρίσει ξένα σώματα και τραυματισμένους ιστούς σε οξείες ή χρόνιες ασθένειες για να ξεκινήσει την καταρράκτη αντίδραση επούλωσης πληγών και τη φλεγμονώδη οδό.Το έμφυτο και προσαρμοστικό ανοσοποιητικό σύστημα προστατεύει τον ξενιστή από μόλυνση και τα λευκά αιμοσφαίρια παίζουν σημαντικό ρόλο στην επικάλυψη μεταξύ των δύο συστημάτων.Συγκεκριμένα, τα μονοκύτταρα, τα μακροφάγα, τα ουδετερόφιλα και τα φυσικά κύτταρα φονείς παίζουν βασικό ρόλο στο έμφυτο σύστημα, ενώ τα λεμφοκύτταρα και τα υποσύνολά τους παίζουν παρόμοιο ρόλο στο προσαρμοστικό ανοσοποιητικό σύστημα.

Αλληλεπιδράσεις αιμοπεταλίων και λευκοκυττάρων σε έμφυτες αλληλεπιδράσεις ανοσοκυττάρων.Τα αιμοπετάλια αλληλεπιδρούν με τα ουδετερόφιλα και τα μονοκύτταρα και τέλος με το Μ Φ Αλληλεπιδρούν, προσαρμόζουν και αυξάνουν τις τελεστικές λειτουργίες τους.Αυτές οι αλληλεπιδράσεις αιμοπεταλίων-λευκοκυττάρων οδηγούν σε φλεγμονή μέσω διαφορετικών μηχανισμών, συμπεριλαμβανομένης της NETosis.Συντομογραφίες: MPO: μυελοϋπεροξειδάση, ROS: αντιδραστικά είδη οξυγόνου, TF: παράγοντας ιστού, NET: εξωκυτταρική παγίδα ουδετερόφιλων, NF-κ B: Πυρηνικός παράγοντας κάπα B, M Φ: Μακροφάγοι.

Έμφυτο ανοσοποιητικό σύστημα

Ο ρόλος του έμφυτου ανοσοποιητικού συστήματος είναι να αναγνωρίζει μη ειδικούς διεισδυτικούς μικροοργανισμούς ή θραύσματα ιστού και να διεγείρει την κάθαρσή τους.Όταν ορισμένες μοριακές δομές που ονομάζονται υποδοχείς αναγνώρισης προτύπων έκφρασης επιφάνειας (PRRs) συνδυάζονται με μοριακά μοτίβα που σχετίζονται με παθογόνα και μοριακά μοτίβα που σχετίζονται με βλάβη, το έμφυτο ανοσοποιητικό σύστημα θα ενεργοποιηθεί.Υπάρχουν πολλά είδη PRR, συμπεριλαμβανομένων των υποδοχέων τύπου Toll (TLR) και των υποδοχέων τύπου RIG-1 (RLR).Αυτοί οι υποδοχείς μπορούν να ενεργοποιήσουν τον κύριο μεταγραφικό παράγοντα κάπα Β (NF-κ B) Ρυθμίζει επίσης πολλαπλές πτυχές της έμφυτης και προσαρμοστικής ανοσολογικής απόκρισης.Είναι ενδιαφέρον ότι τα αιμοπετάλια εκφράζουν επίσης μια ποικιλία μορίων ανοσορυθμιστικών υποδοχέων στην επιφάνεια και το κυτταρόπλασμά τους, όπως η Ρ-σελεκτίνη, ο συνδέτης διαμεμβρανικής πρωτεΐνης CD40 (CD40L), οι κυτοκίνες (όπως η IL-1 β, ο TGF-β) και το ειδικό για τα αιμοπετάλια TLR. Επομένως, τα αιμοπετάλια μπορούν να αλληλεπιδράσουν με διάφορα κύτταρα του ανοσοποιητικού συστήματος.

Αλληλεπίδραση αιμοπεταλίων-λευκών κυττάρων στην έμφυτη ανοσία

Όταν τα αιμοπετάλια εισέρχονται ή εισβάλλουν στη ροή του αίματος ή στον ιστό, τα αιμοπετάλια είναι ένα από τα κύτταρα που ανιχνεύουν πρώτα τον ενδοθηλιακό τραυματισμό και τα μικροβιακά παθογόνα.Συσσωμάτωση αιμοπεταλίων και προωθεί την απελευθέρωση αγωνιστών αιμοπεταλίων ADP, θρομβίνης και vWF, με αποτέλεσμα την ενεργοποίηση των αιμοπεταλίων και την έκφραση των υποδοχέων χημειοκίνης των αιμοπεταλίων C, CC, CXC και CX3C, προκαλώντας έτσι αιμοπετάλια στο μολυσμένο σημείο ή τραυματισμό.

Το έμφυτο ανοσοποιητικό σύστημα είναι γενετικά προκαθορισμένο να ανιχνεύει εισβολείς, όπως ιούς, βακτήρια, παράσιτα και τοξίνες ή πληγές και πληγές ιστών.Είναι ένα μη ειδικό σύστημα, γιατί οποιοδήποτε παθογόνο θα αναγνωριστεί ως ξένο ή μη εαυτό και θα εντοπιστεί γρήγορα.Το έμφυτο ανοσοποιητικό σύστημα βασίζεται σε ένα σύνολο πρωτεϊνών και φαγοκυττάρων, τα οποία αναγνωρίζουν τα καλά διατηρημένα χαρακτηριστικά των παθογόνων και ενεργοποιούν γρήγορα την ανοσολογική απόκριση για να βοηθήσουν στην εξάλειψη των εισβολέων, ακόμα κι αν ο ξενιστής δεν έχει εκτεθεί ποτέ σε συγκεκριμένα παθογόνα.

Τα ουδετερόφιλα, τα μονοκύτταρα και τα δενδριτικά κύτταρα είναι τα πιο κοινά έμφυτα κύτταρα του ανοσοποιητικού συστήματος στο αίμα.Η πρόσληψή τους είναι απαραίτητη για μια επαρκή έγκαιρη ανοσολογική απόκριση.Όταν το PRP χρησιμοποιείται στην αναγεννητική ιατρική, η αλληλεπίδραση αιμοπεταλίων-λευκών κυττάρων ρυθμίζει τη φλεγμονή, την επούλωση πληγών και την επιδιόρθωση των ιστών.Το TLR-4 στα αιμοπετάλια διεγείρει την αλληλεπίδραση αιμοπεταλίων-ουδετερόφιλων, η οποία ρυθμίζει τη λεγόμενη οξειδωτική έκρηξη λευκοκυττάρων ρυθμίζοντας την απελευθέρωση δραστικών ειδών οξυγόνου (ROS) και μυελοϋπεροξειδάσης (MPO) από ουδετερόφιλα.Επιπλέον, η αλληλεπίδραση μεταξύ αιμοπεταλίων-ουδετερόφιλων και αποκοκκίωσης ουδετερόφιλων οδηγεί στο σχηματισμό ουδετερόφιλων-εξωκυτταρικών παγίδων (NETs).Τα NETs αποτελούνται από πυρήνα ουδετερόφιλων και άλλα ενδοκυτταρικά περιεχόμενα ουδετερόφιλων, τα οποία μπορούν να συλλάβουν βακτήρια και να τα σκοτώσουν μέσω της NETosis.Ο σχηματισμός NETs είναι ένας ουσιαστικός μηχανισμός θανάτωσης των ουδετερόφιλων.

Μετά την ενεργοποίηση των αιμοπεταλίων, τα μονοκύτταρα μπορούν να μεταναστεύσουν σε ασθενείς και εκφυλιστικούς ιστούς, όπου εκτελούν δραστηριότητες προσκόλλησης και εκκρίνουν φλεγμονώδη μόρια που μπορεί να αλλάξουν τη χημειοταξία και τις πρωτεολυτικές ιδιότητες.Επιπλέον, τα αιμοπετάλια μπορούν να προκαλέσουν ενεργοποίηση μονοκυττάρου NF-κ Β για τη ρύθμιση της λειτουργίας τελεστή των μονοκυττάρων, που είναι ο βασικός μεσολαβητής της φλεγμονώδους απόκρισης και της ενεργοποίησης και διαφοροποίησης των κυττάρων του ανοσοποιητικού.Τα αιμοπετάλια προάγουν περαιτέρω την ενδογενή οξειδωτική έκρηξη μονοκυττάρων για την προώθηση της καταστροφής των φαγοκυτταρικών παθογόνων.Η απελευθέρωση MPO προκαλείται από την άμεση αλληλεπίδραση μεταξύ αιμοπεταλίου-μονοκυττάρου CD40L-MAC-1.Είναι ενδιαφέρον ότι όταν η Ρ-σελεκτίνη ενεργοποιεί τα αιμοπετάλια υπό οξείες και χρόνιες φλεγμονώδεις καταστάσεις ιστού, οι χημειοκίνες PF4, RANTES, IL-1 β και CXCL-12 που προέρχονται από αιμοπετάλια μπορούν να αποτρέψουν την αυθόρμητη απόπτωση των μονοκυττάρων, αλλά προάγουν τη διαφοροποίησή τους σε μακροφάγα.

Προσαρμοστικό ανοσοποιητικό σύστημα

Αφού το μη ειδικό έμφυτο ανοσοποιητικό σύστημα αναγνωρίσει τη μικροβιακή ή ιστική βλάβη, το συγκεκριμένο προσαρμοστικό ανοσοποιητικό σύστημα θα αναλάβει.Τα προσαρμοστικά συστήματα περιλαμβάνουν Β λεμφοκύτταρα που δεσμεύουν αντιγόνο (κύτταρα Β) και συμβατικά Τ λεμφοκύτταρα (Treg) που συντονίζουν την κάθαρση των παθογόνων.Τα Τ κύτταρα μπορούν χονδρικά να χωριστούν σε βοηθητικά Τ κύτταρα (Th κύτταρα) και κυτταροτοξικά Τ κύτταρα (Τc κύτταρα, επίσης γνωστά ως κύτταρα Τ φονείς).Τα κύτταρα Th διαιρούνται περαιτέρω σε κύτταρα Th1, Th2 και Th17, τα οποία έχουν βασικές λειτουργίες στη φλεγμονή.Τα κύτταρα Th μπορούν να εκκρίνουν προφλεγμονώδεις κυτοκίνες (π.χ. IFN-γ, TNF-β) και αρκετές ιντερλευκίνες (π.χ. IL-17). Είναι ιδιαίτερα αποτελεσματικά στην πρόληψη ενδοκυτταρικών ιών και βακτηριακών λοιμώξεων. Τα κύτταρα Th διεγείρουν τον πολλαπλασιασμό και τη διαφοροποίηση των κυττάρων που εμπλέκονται σε ανοσοαπόκριση Τα κύτταρα Tc είναι τελεστικά κύτταρα, τα οποία μπορούν να εξαλείψουν στοχευμένους ενδοκυτταρικούς και εξωκυτταρικούς μικροοργανισμούς και κύτταρα.

Είναι ενδιαφέρον ότι τα κύτταρα Th2 παράγουν IL-4 και επηρεάζουν την Πόλωση Μ Φ, Φαινότυπο Μ Φ 2 καθοδηγούμενη αναγέννηση, ενώ η IFN-γ Μ Φ αλλάζει σε φλεγμονώδη φαινότυπο Μ Φ 1, που εξαρτάται από τη δόση και το χρόνο των κυτοκινών.Αφού ενεργοποιηθεί η IL-4, η Μ Φ2 προκαλεί τα κύτταρα Treg να διαφοροποιηθούν σε κύτταρα Th2 και στη συνέχεια παράγει επιπλέον IL-4 (βρόχος θετικής ανάδρασης).Τα κύτταρα Th μετατρέπουν Μ Φ Ο φαινότυπος κατευθύνεται στον αναγεννητικό φαινότυπο ως απόκριση σε βιολογικούς παράγοντες ιστικής προέλευσης.Αυτός ο μηχανισμός βασίζεται στην απόδειξη ότι τα κύτταρα Th διαδραματίζουν σημαντικό ρόλο στον έλεγχο της φλεγμονής και στην επισκευή των ιστών.

Αλληλεπίδραση αιμοπεταλίων-λευκών κυττάρων στην προσαρμοστική ανοσία

Το προσαρμοστικό ανοσοποιητικό σύστημα χρησιμοποιεί ειδικούς για αντιγόνο υποδοχείς και θυμάται παθογόνα που έχουν συναντήσει προηγουμένως και τα καταστρέφει όταν στη συνέχεια συναντήσει τον ξενιστή.Ωστόσο, αυτές οι προσαρμοστικές ανοσολογικές αποκρίσεις αναπτύχθηκαν αργά.Konias et al.Δείχνει ότι το συστατικό των αιμοπεταλίων συμβάλλει στην αντίληψη του κινδύνου και στην επιδιόρθωση των ιστών και ότι η αλληλεπίδραση μεταξύ των αιμοπεταλίων και των λευκοκυττάρων προάγει την ενεργοποίηση της προσαρμοστικής ανοσοαπόκρισης.

Κατά τη διάρκεια της προσαρμοστικής ανοσοαπόκρισης, τα αιμοπετάλια προάγουν τις αποκρίσεις των μονοκυττάρων και των μακροφάγων μέσω της ωρίμανσης των κυττάρων DC και NK, οδηγώντας σε ειδικές αποκρίσεις Τ και Β κυττάρων.Επομένως, τα συστατικά των κόκκων αιμοπεταλίων επηρεάζουν άμεσα την προσαρμοστική ανοσία εκφράζοντας το CD40L, ένα μόριο που είναι απαραίτητο για τη ρύθμιση της προσαρμοστικής ανοσοαπόκρισης.Τα αιμοπετάλια μέσω του CD40L όχι μόνο παίζουν ρόλο στην παρουσίαση αντιγόνου, αλλά επηρεάζουν επίσης την αντίδραση των Τ κυττάρων.Οι Liu et al.Βρέθηκε ότι τα αιμοπετάλια ρυθμίζουν την απόκριση των CD4 Τ κυττάρων με πολύπλοκο τρόπο.Αυτή η διαφορική ρύθμιση των υποσυνόλων των CD4 Τ κυττάρων σημαίνει ότι τα αιμοπετάλια προωθούν τα CD4 Τ κύτταρα να ανταποκρίνονται σε φλεγμονώδη ερεθίσματα, παράγοντας έτσι ισχυρές προφλεγμονώδεις και αντιφλεγμονώδεις αποκρίσεις.

Τα αιμοπετάλια ρυθμίζουν επίσης την προσαρμοστική απόκριση με τη μεσολάβηση Β κυττάρων σε μικροβιακά παθογόνα.Είναι πολύ γνωστό ότι το CD40L σε ενεργοποιημένα CD4 Τ κύτταρα θα ενεργοποιήσει το CD40 των Β κυττάρων, παρέχοντας το δεύτερο σήμα που απαιτείται για την εξαρτώμενη από Τ-κύτταρα ενεργοποίηση των Β λεμφοκυττάρων, την επακόλουθη μετατροπή αλλοτύπου και τη διαφοροποίηση και πολλαπλασιασμό των Β κυττάρων.Γενικά, τα αποτελέσματα δείχνουν ξεκάθαρα τις διάφορες λειτουργίες των αιμοπεταλίων στην προσαρμοστική ανοσία, υποδεικνύοντας ότι τα αιμοπετάλια συνδέουν την αλληλεπίδραση μεταξύ Τ κυττάρων και Β κυττάρων μέσω CD40-CD40L, ενισχύοντας έτσι την εξαρτώμενη από Τ-κύτταρα απόκριση Β κυττάρων.Επιπλέον, τα αιμοπετάλια είναι πλούσια σε υποδοχείς κυτταρικής επιφάνειας, οι οποίοι μπορούν να προάγουν την ενεργοποίηση των αιμοπεταλίων και να απελευθερώνουν μεγάλο αριθμό φλεγμονωδών και βιολογικών ενεργών μορίων που αποθηκεύονται σε διαφορετικά σωματίδια αιμοπεταλίων, επηρεάζοντας έτσι την έμφυτη και προσαρμοστική ανοσοαπόκριση.

Διευρυμένος ρόλος της σεροτονίνης που προέρχεται από αιμοπετάλια στο PRP

Η σεροτονίνη (5-υδροξυτρυπταμίνη, 5-HT) έχει σαφή βασικό ρόλο στο κεντρικό νευρικό σύστημα (ΚΝΣ), συμπεριλαμβανομένης της ανοχής στον πόνο.Υπολογίζεται ότι το μεγαλύτερο μέρος του ανθρώπινου 5-HT παράγεται στη γαστρεντερική οδό και στη συνέχεια μέσω της κυκλοφορίας του αίματος, όπου απορροφάται από τα αιμοπετάλια μέσω του μεταφορέα επαναπρόσληψης σεροτονίνης και αποθηκεύεται σε πυκνά σωματίδια σε υψηλή συγκέντρωση (65 mmol/L).Το 5-HT είναι ένας πολύ γνωστός νευροδιαβιβαστής και ορμόνη που βοηθά στη ρύθμιση διαφόρων νευροψυχολογικών διεργασιών στο ΚΝΣ (κεντρικό 5-HT).Ωστόσο, το μεγαλύτερο μέρος του 5-ΗΤ υπάρχει εκτός ΚΝΣ (περιφερικό 5-ΗΤ) και εμπλέκεται στη ρύθμιση των συστημικών και κυτταρικών βιολογικών λειτουργιών πολλαπλών οργάνων συστημάτων, συμπεριλαμβανομένων των καρδιαγγειακών, πνευμόνων, γαστρεντερικών, ουρογεννητικών και αιμοπεταλίων.Το 5-HT έχει μεταβολισμό που εξαρτάται από τη συγκέντρωση σε μια ποικιλία τύπων κυττάρων, συμπεριλαμβανομένων των λιποκυττάρων, των επιθηλιακών κυττάρων και των λευκών αιμοσφαιρίων.Το Peripheral 5-HT είναι επίσης ένας ισχυρός ανοσορυθμιστής, ο οποίος μπορεί να διεγείρει ή να αναστείλει τη φλεγμονή και να επηρεάσει διάφορα ανοσοκύτταρα μέσω του ειδικού του υποδοχέα 5-HT (5HTR).

Παρακρινικός και αυτοκρινής μηχανισμός της ΗΤ

Η δραστηριότητα του 5-HT διαμεσολαβείται από την αλληλεπίδρασή του με 5HTRs, η οποία είναι μια υπεροικογένεια με επτά μέλη (5-HT 1 – 7) και τουλάχιστον 14 διαφορετικούς υποτύπους υποδοχέα, συμπεριλαμβανομένου του πρόσφατα ανακαλυφθέντος μέλους 5-HT 7, των περιφερειακών και λειτουργία στη διαχείριση του πόνου.Στη διαδικασία της αποκοκκίωσης των αιμοπεταλίων, τα ενεργοποιημένα αιμοπετάλια εκκρίνουν μεγάλο αριθμό 5-HT που προέρχεται από αιμοπετάλια, η οποία μπορεί να προάγει την αγγειακή συστολή και να διεγείρει την ενεργοποίηση γειτονικών αιμοπεταλίων και λεμφοκυττάρων μέσω της έκφρασης του 5-HTR σε ενδοθηλιακά κύτταρα, λεία μυϊκά κύτταρα και κύτταρα του ανοσοποιητικού συστήματος.Pacala et al.Μελετήθηκε η μιτωτική επίδραση του 5-ΗΤ στα αγγειακά ενδοθηλιακά κύτταρα και προσδιορίστηκε η δυνατότητα προώθησης της ανάπτυξης κατεστραμμένων αιμοφόρων αγγείων μέσω της διέγερσης της αγγειογένεσης.Το πώς ρυθμίζονται αυτές οι διεργασίες δεν είναι απολύτως σαφές, αλλά μπορεί να περιλαμβάνει διαφορικές αμφίδρομες οδούς σήματος στο μικροκύκλωμα ιστού για τη ρύθμιση των λειτουργιών των αγγειακών ενδοθηλιακών κυττάρων και των λείων μυϊκών κυττάρων, των ινοβλαστών και των ανοσοκυττάρων μέσω συγκεκριμένων υποδοχέων 5-HT σε αυτά τα κύτταρα .Η αυτοκρινή λειτουργία του αιμοπεταλίου 5-HT μετά την ενεργοποίηση των αιμοπεταλίων έχει περιγραφεί [REF].Η απελευθέρωση του 5-HT ενισχύει την ενεργοποίηση των αιμοπεταλίων και τη στρατολόγηση των κυκλοφορούντων αιμοπεταλίων, οδηγώντας στην ενεργοποίηση των αντιδράσεων καταρράκτη σήματος και των ανοδικών τελεστών που υποστηρίζουν την αντιδραστικότητα των αιμοπεταλίων.

Ανοσοτροποποιητικό αποτέλεσμα 5-HT

Όλο και περισσότερα στοιχεία δείχνουν ότι η σεροτονίνη μπορεί να παίξει ρόλο σε διαφορετικά 5HTR ως ανοσορυθμιστής.Σύμφωνα με το 5HTR που εκφράζεται σε διάφορα λευκοκύτταρα που εμπλέκονται στη φλεγμονώδη αντίδραση, το 5-HT που προέρχεται από αιμοπετάλια δρα ως ρυθμιστής του ανοσοποιητικού συστήματος τόσο στο έμφυτο όσο και στο προσαρμοστικό ανοσοποιητικό σύστημα.Το 5-HT μπορεί να διεγείρει τον πολλαπλασιασμό του Treg και να ρυθμίσει τις λειτουργίες των Β κυττάρων, των φυσικών φονικών κυττάρων και των ουδετερόφιλων στρατολογώντας DC και μονοκύτταρα στο σημείο της φλεγμονής.Πρόσφατες μελέτες έχουν δείξει ότι το 5-HT που προέρχεται από αιμοπετάλια μπορεί να ρυθμίσει τη λειτουργία των ανοσοκυττάρων υπό συγκεκριμένες συνθήκες.Επομένως, χρησιμοποιώντας το C-PRP, η συγκέντρωση αιμοπεταλίων είναι μεγαλύτερη από 1 × 10 6/μL μπορεί να βοηθήσει σημαντικά στη μεταφορά της συγκέντρωσης του 5-HT που προέρχεται από μεγάλα αιμοπετάλια στον ιστό.Στο μικροπεριβάλλον που χαρακτηρίζεται από φλεγμονώδη συστατικά, το PRP μπορεί να αλληλεπιδράσει με πολλά ανοσοκύτταρα που παίζουν βασικό ρόλο σε αυτές τις παθολογίες, γεγονός που μπορεί να επηρεάσει τα κλινικά αποτελέσματα.

Εικόνα που εμφανίζει την πολύπλευρη απόκριση 5-HT μετά την ενεργοποίηση των φλεγμονωδών αιμοπεταλίων PRP.Μετά την ενεργοποίηση των αιμοπεταλίων, τα αιμοπετάλια απελευθερώνουν τους κόκκους τους, συμπεριλαμβανομένου του 5-HT σε πυκνούς κόκκους, το οποίο έχει ένα ευρύ φάσμα διαφορικών επιδράσεων σε διάφορα κύτταρα του ανοσοποιητικού, ενδοθηλιακά κύτταρα και λεία μυϊκά κύτταρα.Συντομογραφίες: SMC: λεία μυϊκά κύτταρα, EC: ενδοθηλιακά κύτταρα, Treg: συμβατικά Τ λεμφοκύτταρα, M Φ: Μακροφάγοι, DC: δενδριτικά κύτταρα, IL: ιντερλευκίνη, IFN-γ: Ιντερφερόνη γ. Τροποποιήθηκε και προσαρμόστηκε από Everts et al.και Hull et al.

Αναλγητική δράση του PRP

Τα ενεργοποιημένα αιμοπετάλια θα απελευθερώσουν πολλούς προφλεγμονώδεις και αντιφλεγμονώδεις μεσολαβητές, οι οποίοι όχι μόνο μπορούν να προκαλέσουν πόνο, αλλά και να μειώσουν τη φλεγμονή και τον πόνο.Μόλις εφαρμοστεί, η τυπική δυναμική των αιμοπεταλίων του PRP αλλάζει το μικροπεριβάλλον πριν από την επιδιόρθωση και την αναγέννηση των ιστών μέσω μιας ποικιλίας πολύπλοκων οδών που σχετίζονται με τον αναβολισμό και τον καταβολισμό, τον πολλαπλασιασμό των κυττάρων, τη διαφοροποίηση και τη ρύθμιση των βλαστοκυττάρων.Αυτά τα χαρακτηριστικά του PRP οδηγούν στην εφαρμογή του PRP σε διάφορες κλινικές παθολογικές καταστάσεις που συνήθως συνδέονται με χρόνιο πόνο (όπως αθλητικός τραυματισμός, ορθοπεδική νόσος, νόσος της σπονδυλικής στήλης και σύνθετη χρόνια πληγή), αν και ο ακριβής μηχανισμός δεν έχει προσδιοριστεί πλήρως.

Το 2008, οι Evertz et al.Είναι η πρώτη τυχαιοποιημένη ελεγχόμενη δοκιμή που αναφέρει το αναλγητικό αποτέλεσμα του σκευάσματος PRP, το οποίο παρασκευάζεται από το καφέ στρώμα του ρυθμού καθίζησης αυτόλογων ερυθροκυττάρων και ενεργοποιείται με αυτόλογη θρομβίνη μετά από χειρουργική επέμβαση ώμου.Παρατήρησαν σημαντική μείωση στις βαθμολογίες της οπτικής αναλογικής κλίμακας, τη χρήση αναλγητικών με βάση τα οπιοειδή και πιο επιτυχημένη μετεγχειρητική αποκατάσταση.Είναι αξιοσημείωτο ότι αντανακλούν την αναλγητική δράση των ενεργοποιημένων αιμοπεταλίων και εικάζουν τον μηχανισμό της απελευθέρωσης 5-HT από τα αιμοπετάλια.Εν ολίγοις, τα αιμοπετάλια είναι αδρανοποιημένα στο φρεσκοπαρασκευασμένο PRP.Μετά την άμεση ή έμμεση ενεργοποίηση των αιμοπεταλίων (ιστικός παράγοντας), τα αιμοπετάλια αλλάζουν σχήμα και παράγουν αρκετά ψευδή ώστε να προάγουν τη συσσώρευση αιμοπεταλίων.Στη συνέχεια, απελευθερώνουν ενδοκυτταρικά α- Και πυκνά σωματίδια.Ο ιστός που υποβάλλεται σε θεραπεία με ενεργοποιημένο PRP θα εισβάλει από PGF, κυτοκίνες και άλλα λυσοσώματα αιμοπεταλίων.Πιο συγκεκριμένα, όταν τα πυκνά σωματίδια απελευθερώνουν το περιεχόμενό τους, θα απελευθερώσουν μεγάλη ποσότητα 5-HT που ρυθμίζει τον πόνο.Στο C-PRP, η συγκέντρωση των αιμοπεταλίων είναι 5 έως 7 φορές υψηλότερη από αυτή στο περιφερικό αίμα.Επομένως, η απελευθέρωση 5-HT από τα αιμοπετάλια είναι αστρονομική.Είναι ενδιαφέρον ότι οι Sprott et al.Η αναφορά παρατήρησε ότι ο πόνος ανακουφίστηκε σημαντικά μετά από βελονισμό και οξυγόνο, η συγκέντρωση του προερχόμενου από αιμοπετάλια 5-HT μειώθηκε σημαντικά και στη συνέχεια το επίπεδο του 5-HT στο πλάσμα αυξήθηκε.

Στο περιφερικό, τα αιμοπετάλια, τα μαστοκύτταρα και τα ενδοθηλιακά κύτταρα θα απελευθερώσουν ενδογενή 5-ΗΤ κατά τη διάρκεια τραυματισμού ιστού ή χειρουργικού τραύματος.Είναι ενδιαφέρον ότι μια ποικιλία 5-HT υποδοχέων νευρώνων ανιχνεύθηκε στην περιφερική περιοχή, γεγονός που επιβεβαίωσε ότι το 5-HT μπορεί να επηρεάσει τη μετάδοση του πόνου στην περιφερική περιοχή.Αυτές οι μελέτες δείχνουν ότι το 5-HT μπορεί να επηρεάσει την αλγογόνο μετάδοση των περιφερικών ιστών μέσω των υποδοχέων 5-HT1, 5-HT2, 5-HT3, 5-HT4 και 5-HT7.

Το σύστημα 5-HT αντιπροσωπεύει ένα ισχυρό σύστημα που μπορεί να μειώσει και να αυξήσει τον βαθμό του πόνου μετά από επιβλαβή διέγερση.Η κεντρική και η περιφερική ρύθμιση των ερεθιστικών σημάτων και οι αλλαγές στο σύστημα 5-HT έχουν αναφερθεί σε ασθενείς με χρόνιο πόνο.Τα τελευταία χρόνια, ένας μεγάλος αριθμός μελετών έχει επικεντρωθεί στον ρόλο του 5-HT και των αντίστοιχων υποδοχέων του στην επεξεργασία και ρύθμιση επιβλαβών πληροφοριών, με αποτέλεσμα φάρμακα όπως οι εκλεκτικοί αναστολείς επαναπρόσληψης σεροτονίνης (SSRI).Αυτό το φάρμακο αναστέλλει την επαναπρόσληψη της σεροτονίνης στους προσυναπτικούς νευρώνες μετά την απελευθέρωση της σεροτονίνης.Επηρεάζει τη διάρκεια και την ένταση της επικοινωνίας της σεροτονίνης και αποτελεί εναλλακτική θεραπεία για τον χρόνιο πόνο.Απαιτείται περαιτέρω κλινική έρευνα για την ξεκάθαρη κατανόηση του μοριακού μηχανισμού της ρύθμισης του πόνου 5-HT που προέρχεται από PRP σε χρόνιες και εκφυλιστικές ασθένειες.

Άλλα δεδομένα για την επίλυση του πιθανού αναλγητικού αποτελέσματος του PRP μπορούν να ληφθούν μετά τη δοκιμή αναλγητικού ζωικού μοντέλου.Τα συγκριτικά στατιστικά συμπεράσματα σε αυτά τα μοντέλα είναι προκλητικά επειδή αυτές οι μελέτες περιέχουν πάρα πολλές μεταβλητές.Παρ' όλα αυτά, ορισμένες κλινικές μελέτες έχουν ασχοληθεί με τις παθολογικές και αναλγητικές επιδράσεις του PRP.Αρκετές μελέτες έχουν δείξει ότι οι ασθενείς που λαμβάνουν θεραπεία για τενίνωση ή ρήξεις του στροφικού πετάλου έχουν μικρή ανακούφιση από τον πόνο.Αντίθετα, αρκετές άλλες μελέτες έχουν δείξει ότι το PRP μπορεί να μειώσει ή και να εξαλείψει τον πόνο ασθενών με εκφύλιση τενόντων, ΟΑ, πελματιαία απονευρωσίτιδα και άλλες παθήσεις του ποδιού και του αστραγάλου.Η τελική συγκέντρωση αιμοπεταλίων και η βιολογική σύνθεση των κυττάρων έχουν αναγνωριστεί ως τα βασικά χαρακτηριστικά του PRP, τα οποία βοηθούν στην παρατήρηση της σταθερής αναλγητικής δράσης μετά την εφαρμογή του PRP.Άλλες μεταβλητές περιλαμβάνουν τη μέθοδο χορήγησης PRP, την τεχνολογία εφαρμογής, το πρωτόκολλο ενεργοποίησης των αιμοπεταλίων, το επίπεδο βιολογικής δραστηριότητας του PGF και των κυτοκινών που απελευθερώνονται, τον τύπο ιστού εφαρμογής PRP και τον τύπο τραυματισμού.

Είναι αξιοσημείωτο ότι ο Kuffler έλυσε τη δυνατότητα του PRP στην ανακούφιση του πόνου σε ασθενείς με ήπιο έως σοβαρό χρόνιο νευροπαθητικό πόνο, δευτερογενή στο κατεστραμμένο μη αναγεννητικό νεύρο.Ο σκοπός αυτής της μελέτης είναι να διερευνήσει εάν ο νευροπαθητικός πόνος μπορεί να μειωθεί ή να υποχωρήσει λόγω του PRP που προάγει την αξονική αναγέννηση και την επανανεύρωση του νεύρου στόχου.Παραδόξως, μεταξύ των ασθενών που λαμβάνουν θεραπεία, ο νευροπαθητικός πόνος εξακολουθεί να εξαλείφεται ή να ανακουφίζεται τουλάχιστον έξι χρόνια μετά την επέμβαση.Επιπλέον, όλοι οι ασθενείς άρχισαν να ανακουφίζουν από τον πόνο μέσα σε τρεις εβδομάδες μετά την εφαρμογή του PRP.

Πρόσφατα, παρόμοια αναλγητικά αποτελέσματα PRP έχουν παρατηρηθεί στον τομέα της μετεγχειρητικής περιποίησης πληγών και δέρματος.Είναι ενδιαφέρον ότι οι συγγραφείς ανέφεραν τις φυσιολογικές πτυχές του πόνου του τραύματος που σχετίζονται με τον αγγειακό τραυματισμό και την υποξία του δερματικού ιστού.Συζήτησαν επίσης τη σημασία της αγγειογένεσης στη βελτιστοποίηση της οξυγόνωσης και της παροχής θρεπτικών συστατικών.Η μελέτη τους έδειξε ότι σε σύγκριση με την ομάδα ελέγχου, οι ασθενείς που έλαβαν θεραπεία PRP είχαν λιγότερο πόνο και σημαντικά αυξημένη αγγειογένεση.Τέλος, ο Johal και οι συνεργάτες του πραγματοποίησαν μια συστηματική ανασκόπηση και μετα-ανάλυση και κατέληξαν στο συμπέρασμα ότι το PRP μπορεί να μειώσει τον πόνο μετά τη χρήση του PRP σε ορθοπεδικές ενδείξεις, ειδικά σε ασθενείς που λαμβάνουν θεραπεία εξωτερικής επικονδυλίτιδας και οστεοαρθρίτιδας γόνατος.Δυστυχώς, αυτή η μελέτη δεν διευκρίνισε τις επιδράσεις των λευκών αιμοσφαιρίων, τη συγκέντρωση αιμοπεταλίων ή τη χρήση εξωγενών ενεργοποιητών αιμοπεταλίων, επειδή αυτές οι μεταβλητές θα επηρέαζαν τη συνολική αποτελεσματικότητα του PRP.Η βέλτιστη συγκέντρωση αιμοπεταλίων PRP για μέγιστη ανακούφιση από τον πόνο είναι ασαφής.Στο μοντέλο τενίνωσης αρουραίου, η συγκέντρωση αιμοπεταλίων ήταν 1,0 × 10 6 / μ Στο L, ο πόνος μπορεί να ανακουφιστεί πλήρως, ενώ η ανακούφιση από τον πόνο που προκαλείται από το PRP με το ήμισυ της συγκέντρωσης αιμοπεταλίων μειώνεται σημαντικά.Ως εκ τούτου, ενθαρρύνουμε περισσότερες κλινικές μελέτες για τη διερεύνηση των αναλγητικών επιδράσεων διαφορετικών σκευασμάτων PRP.

PRP και επίδραση αγγειογένεσης

Τα παρασκευάσματα C-PRP στην ακριβή αναγεννητική ιατρική επιτρέπουν την παροχή βιομορίων που απελευθερώνονται από υψηλές συγκεντρώσεις αιμοπεταλίων που ενεργοποιούνται στις θέσεις ιστών-στόχων.Ως εκ τούτου, έχει ξεκινήσει μια ποικιλία αντιδράσεων καταρράκτη, οι οποίες συμβάλλουν στην επιτόπια ανοσορύθμιση, τη φλεγμονώδη διαδικασία και την αγγειογένεση για την προώθηση της επούλωσης και της επιδιόρθωσης των ιστών.

Η αγγειογένεση είναι μια δυναμική διαδικασία πολλαπλών σταδίων που περιλαμβάνει βλάστηση και μικροαγγεία ιστών από προϋπάρχοντα αιμοφόρα αγγεία.Η αγγειογένεση έχει προχωρήσει λόγω μιας ποικιλίας βιολογικών μηχανισμών, συμπεριλαμβανομένης της μετανάστευσης, του πολλαπλασιασμού, της διαφοροποίησης και της διαίρεσης των ενδοθηλιακών κυττάρων.Αυτές οι κυτταρικές διεργασίες αποτελούν προϋποθέσεις για το σχηματισμό νέων αιμοφόρων αγγείων.Είναι απαραίτητα για την ανάπτυξη των προϋπαρχόντων αιμοφόρων αγγείων για την αποκατάσταση της ροής του αίματος και την υποστήριξη της υψηλής μεταβολικής δραστηριότητας της επιδιόρθωσης των ιστών και της αναγέννησης των ιστών.Αυτά τα νέα αιμοφόρα αγγεία επιτρέπουν την παροχή οξυγόνου και θρεπτικών ουσιών και την απομάκρυνση των υποπροϊόντων από τους ιστούς που έχουν υποστεί θεραπεία.

Η δραστηριότητα της αγγειογένεσης ρυθμίζεται με τη διέγερση του αγγειογόνου παράγοντα VEGF και αντι-αγγειογενετικών παραγόντων (π.χ. αγγειοστατίνη και θρομβοσποντίνη-1 [TSP-1]).Στο άρρωστο και υποβαθμισμένο μικροπεριβάλλον (συμπεριλαμβανομένης της χαμηλής τάσης οξυγόνου, του χαμηλού pH και του υψηλού επιπέδου γαλακτικού οξέος), οι τοπικοί αγγειογενετικοί παράγοντες θα αποκαταστήσουν τη δραστηριότητα της αγγειογένεσης.

Πολλά διαλυτά αιμοπετάλια μέσα, όπως τα βασικά FGF και TGF-β και VEGF μπορούν να διεγείρουν τα ενδοθηλιακά κύτταρα να παράγουν νέα αιμοφόρα αγγεία.Οι Landsdown και Fortier ανέφεραν διάφορα αποτελέσματα σχετικά με τη σύνθεση PRP, συμπεριλαμβανομένων των ενδοαιμοπεταλιακών πηγών πολλών αγγειογενετικών ρυθμιστών.Επιπλέον, κατέληξαν στο συμπέρασμα ότι η αύξηση της αγγειογένεσης συμβάλλει στην επούλωση της νόσου MSK σε περιοχές με κακή αγγείωση, όπως ρήξη μηνίσκου, τραυματισμός τένοντα και άλλες περιοχές με κακή αγγείωση.

Προωθητικές και αντι-αγγειογενετικές ιδιότητες αιμοπεταλίων

Τις τελευταίες δεκαετίες, δημοσιευμένες μελέτες έχουν αποδείξει ότι τα αιμοπετάλια διαδραματίζουν βασικό ρόλο στην πρωτογενή αιμόσταση, στο σχηματισμό θρόμβων, στην απελευθέρωση αυξητικού παράγοντα και κυτοκίνης και στη ρύθμιση της αγγειογένεσης ως μέρος της διαδικασίας αποκατάστασης των ιστών.Παραδόξως, οι κόκκοι PRP α- περιέχουν ένα οπλοστάσιο προ-αγγειογόνων αυξητικών παραγόντων, αντι-αγγειογενετικών πρωτεϊνών και κυτοκινών (όπως PF4, αναστολέας ενεργοποιητή πλασμινογόνου-1 και TSP-1) και στοχεύουν στην απελευθέρωση συγκεκριμένων παραγόντων που παίζουν ρόλο .Ρόλος στην αγγειογένεση.Ως εκ τούτου, ο ρόλος του PRP στον έλεγχο της ρύθμισης της αγγειογένεσης μπορεί να καθοριστεί από την ενεργοποίηση συγκεκριμένων υποδοχέων κυτταρικής επιφάνειας, TGF-β Εκκίνηση προ-αγγειογενετικών και αντι-αγγειογενετικών αντιδράσεων.Η ικανότητα των αιμοπεταλίων να ασκούν την οδό αγγειογένεσης έχει επιβεβαιωθεί στην παθολογική αγγειογένεση και στην αγγειογένεση όγκου.

Αγγειογόνος αυξητικός παράγοντας προερχόμενος από αιμοπετάλια και αντι-αγγειογενής αυξητικός παράγοντας, που προέρχονται από α- Και πυκνά και συγκολλητικά μόρια.Το πιο σημαντικό, είναι γενικά αποδεκτό ότι η συνολική επίδραση των αιμοπεταλίων στην αγγειογένεση είναι προ-αγγειογενετική και διεγερτική.Αναμένεται ότι η θεραπεία με PRP θα ελέγχει την πρόκληση αγγειογένεσης, η οποία θα συμβάλει στη θεραπευτική επίδραση πολλών ασθενειών, όπως η επούλωση τραυμάτων και η αποκατάσταση των ιστών.Η χορήγηση PRP, πιο συγκεκριμένα η χορήγηση υψηλής συγκέντρωσης PGF και άλλων κυτοκινών αιμοπεταλίων, μπορεί να προκαλέσει αγγειογένεση, αγγειογένεση και αρτηριογένεση, επειδή ο παράγοντας 1a που προέρχεται από στρωματικά κύτταρα συνδέεται με τον υποδοχέα CXCR4 στα ενδοθηλιακά προγονικά κύτταρα.Bill et al.Προτείνεται ότι το PRP αυξάνει την ισχαιμική νεοαγγείωση, η οποία μπορεί να οφείλεται στη διέγερση της αγγειογένεσης, της αγγειογένεσης και της αρτηριογένεσης.Στο in vitro μοντέλο τους, ο πολλαπλασιασμός των ενδοθηλιακών κυττάρων και ο σχηματισμός τριχοειδών προκλήθηκαν από μεγάλο αριθμό διαφορετικών PDG, εκ των οποίων ο VEGF ήταν ο κύριος αγγειογόνος διεγέρτης.Ένας άλλος σημαντικός και ουσιαστικός παράγοντας για την αποκατάσταση της οδού αγγειογένεσης είναι η συνέργεια μεταξύ πολλαπλών PGFs.Οι Richardson et al.Αποδείχθηκε ότι η συνεργιστική δράση του αυξητικού παράγοντα-bb (PDGF-BB) και του VEGF οδήγησε στον γρήγορο σχηματισμό ώριμου αγγειακού δικτύου σε σύγκριση με τη δραστηριότητα του μεμονωμένου αυξητικού παράγοντα.Η συνδυασμένη επίδραση αυτών των παραγόντων επιβεβαιώθηκε πρόσφατα σε μια μελέτη για την ενίσχυση της εγκεφαλικής παράπλευρης κυκλοφορίας σε ποντίκια με μακροχρόνια υποαιμάτωση.

Το πιο σημαντικό, μια in vitro μελέτη μέτρησε το πολλαπλασιαστικό αποτέλεσμα των ενδοθηλιακών κυττάρων της ανθρώπινης ομφαλικής φλέβας και των διαφόρων συγκεντρώσεων αιμοπεταλίων στην επιλογή της συσκευής παρασκευής PRP και τη στρατηγική δόσης αιμοπεταλίων και τα αποτελέσματα έδειξαν ότι η βέλτιστη δόση αιμοπεταλίων ήταν 1,5 × 10 6 αιμοπετάλια/μ 50. Για την προώθηση της αγγειογένεσης.Πολύ υψηλή συγκέντρωση αιμοπεταλίων μπορεί να αναστείλει τη διαδικασία αγγειογένεσης, επομένως το αποτέλεσμα είναι φτωχό.

Γήρανση κυττάρων, γήρανση και PRP

Η γήρανση των κυττάρων μπορεί να προκληθεί από διάφορα ερεθίσματα.Αυτή είναι μια διαδικασία κατά την οποία τα κύτταρα σταματούν να διαιρούνται και υφίστανται μοναδικές φαινοτυπικές αλλαγές για να αποτρέψουν την απεριόριστη ανάπτυξη κατεστραμμένων κυττάρων, η οποία παίζει σημαντικό ρόλο στην πρόληψη του καρκίνου.Στη διαδικασία της φυσιολογικής γήρανσης, η γήρανση του κυτταρικού πολλαπλασιασμού θα προάγει επίσης τη γήρανση των κυττάρων και η ικανότητα αναγέννησης των MSCs θα μειωθεί.

Επιπτώσεις της γήρανσης και της γήρανσης των κυττάρων

In vivo, πολλοί τύποι κυττάρων θα γεράσουν και θα συσσωρευτούν σε διάφορους ιστούς κατά τη γήρανση, μεταξύ των οποίων υπάρχει μεγάλος αριθμός γηρασμένων κυττάρων.Η συσσώρευση γηραντικών κυττάρων φαίνεται να αυξάνεται με την αύξηση της ηλικίας, τη βλάβη του ανοσοποιητικού συστήματος, τη βλάβη των ιστών ή τους παράγοντες που σχετίζονται με το στρες.Ο μηχανισμός της κυτταρικής γήρανσης έχει αναγνωριστεί ως ο παθογόνος παράγοντας ασθενειών που σχετίζονται με την ηλικία, όπως η οστεοαρθρίτιδα, η οστεοπόρωση και ο εκφυλισμός του μεσοσπονδύλιου δίσκου.Μια ποικιλία ερεθισμάτων θα επιδεινώσει τη γήρανση των κυττάρων.Σε απόκριση, ο εκκριτικός φαινότυπος που σχετίζεται με τη γήρανση (SASP) θα εκκρίνει υψηλές συγκεντρώσεις πρωτεϊνικών κυττάρων και κυτοκινών.Αυτός ο ειδικός φαινότυπος σχετίζεται με τη γήρανση των κυττάρων, στα οποία εκκρίνουν υψηλά επίπεδα φλεγμονωδών κυτοκινών (όπως IL-1, IL-6, IL-8), αυξητικών παραγόντων (όπως TGF-β, HGF, VEGF, PDGF), MMP και καθεψίνη.Σε σύγκριση με τους νέους, το SAPS έχει αποδειχθεί ότι αυξάνεται με την ηλικία, επειδή η διαδικασία της σταθερής κατάστασης καταστρέφεται, με αποτέλεσμα τη γήρανση των κυττάρων και τη μειωμένη ικανότητα αναγέννησης.Συγκεκριμένα, σε παθήσεις των αρθρώσεων και παθήσεις των σκελετικών μυών.Από αυτή την άποψη, η γήρανση του ανοσοποιητικού θεωρείται ότι είναι μια σημαντική αλλαγή στο φάσμα έκκρισης των ανοσοκυττάρων, υποδεικνύοντας ότι η συγκέντρωση των TNF-a, IL-6 και/ή Il-1b αυξάνεται, οδηγώντας σε χρόνια φλεγμονή χαμηλού βαθμού.Αξίζει να σημειωθεί ότι η δυσλειτουργία των βλαστοκυττάρων σχετίζεται και με μη κυτταρικούς αυτόνομους μηχανισμούς, όπως η γήρανση των κυττάρων, ιδιαίτερα η παραγωγή προφλεγμονωδών και αντιαναγεννητικών παραγόντων μέσω του SASP.

Αντίθετα, το SASP μπορεί επίσης να διεγείρει την πλαστικότητα των κυττάρων και τον επαναπρογραμματισμό των γειτονικών κυττάρων.Επιπλέον, το SASP μπορεί να οργανώσει την επικοινωνία με διάφορους ανοσομεσολαβητές και να ενεργοποιήσει τα ανοσοκύτταρα για να προωθήσει την κάθαρση των γηρασμένων κυττάρων.Η κατανόηση του ρόλου και της λειτουργίας των γηρασμένων κυττάρων θα συμβάλει στην επούλωση και την αναδιαμόρφωση των ιστών των μυών MSK και των χρόνιων πληγών.

Είναι αξιοσημείωτο ότι οι Ritcka et al.Πραγματοποιήθηκε μια εκτεταμένη μελέτη και ανακαλύφθηκε ο κύριος και ευεργετικός ρόλος του SASP στην προώθηση της κυτταρικής πλαστικότητας και της αναγέννησης των ιστών και εισήχθη η έννοια της παροδικής θεραπείας παροχής γηρασμένων κυττάρων.Ανέφεραν προσεκτικά ότι η γήρανση είναι κυρίως μια ευεργετική και αναγεννητική διαδικασία.

Γήρανση των κυττάρων και δυνατότητα PRP

Καθώς ο αριθμός των βλαστοκυττάρων μειώνεται, η γήρανση θα επηρεάσει την απόδοση των βλαστοκυττάρων.Ομοίως, στον άνθρωπο, τα χαρακτηριστικά των βλαστοκυττάρων (όπως ξηρότητα, πολλαπλασιασμός και διαφοροποίηση) μειώνονται επίσης με την ηλικία.Οι Wang και Nirmala ανέφεραν ότι η γήρανση θα μείωνε τα χαρακτηριστικά των βλαστικών κυττάρων των τενόντων και τον αριθμό των υποδοχέων αυξητικού παράγοντα.Μια μελέτη σε ζώα έδειξε ότι η συγκέντρωση του PDGF σε νεαρά άλογα ήταν υψηλή.Κατέληξαν στο συμπέρασμα ότι η αύξηση του αριθμού των υποδοχέων GF και του αριθμού των GF σε νεαρά άτομα μπορεί να έχει καλύτερη κυτταρική απόκριση στη θεραπεία PRP από ό,τι τα μεγαλύτερα άτομα σε νεαρά άτομα.Αυτά τα ευρήματα αποκαλύπτουν γιατί η θεραπεία με PRP μπορεί να είναι λιγότερο αποτελεσματική ή ακόμα και αναποτελεσματική σε ηλικιωμένους ασθενείς με λιγότερα βλαστοκύτταρα και «κακής ποιότητας».Έχει αποδειχθεί ότι η διαδικασία γήρανσης της γήρανσης του χόνδρου αντιστρέφεται και η περίοδος ηρεμίας των χονδροκυττάρων αυξάνεται μετά την έγχυση PRP.Οι Jia et al.Χρησιμοποιείται για τη μελέτη των δερματικών ινοβλαστών ποντικών in vitro φωτογήρανσης, με και χωρίς θεραπεία PRP, για να διευκρινιστεί ο μηχανισμός της αντιδράσεως του PGF σε αυτό το μοντέλο.Η ομάδα PRP έδειξε άμεση επίδραση στην εξωκυτταρική μήτρα, αύξησε το κολλαγόνο τύπου Ι και μείωσε τη σύνθεση μεταλλοπρωτεϊνασών, υποδεικνύοντας ότι το PRP μπορεί να εξουδετερώσει τη γήρανση των κυττάρων, καθώς και στην εκφυλιστική νόσο MSK.

Σε άλλη μελέτη, το PRP χρησιμοποιήθηκε για τη συλλογή γερασμένων βλαστοκυττάρων μυελού των οστών από ηλικιωμένα ποντίκια.Έχει προσδιοριστεί ότι το PRP μπορεί να ανακτήσει μια ποικιλία λειτουργιών βλαστοκυττάρων από τη γήρανση, όπως ο πολλαπλασιασμός των κυττάρων και ο σχηματισμός αποικιών, και να ανακατασκευάσει τους δείκτες που σχετίζονται με τη γήρανση των κυττάρων.

Πρόσφατα, ο Oberlohr και οι συνεργάτες του μελέτησαν εκτενώς τον ρόλο της κυτταρικής γήρανσης στην αποδυνάμωση της μυϊκής αναγέννησης και αξιολόγησαν το PRP και το φτωχό σε αιμοπετάλια πλάσμα (PPP) ως βιολογικές επιλογές θεραπείας για την αποκατάσταση των σκελετικών μυών.Οραματίστηκαν ότι η θεραπεία PRP ή PPP για την επισκευή των σκελετικών μυών θα βασιζόταν σε βιολογικούς παράγοντες προσαρμοσμένους για τους ειδικούς κυτταρικούς δείκτες SASP και άλλους παράγοντες που οδηγούν στην ανάπτυξη ίνωσης.

Είναι λογικό να πιστεύουμε ότι πριν από την εφαρμογή του PRP, η στοχευμένη γήρανση των κυττάρων μπορεί να βελτιώσει τα χαρακτηριστικά αναγέννησης της αποτελεσματικότητας της βιολογικής θεραπείας μειώνοντας τους τοπικούς παράγοντες SASP.Έχει προταθεί ότι μια άλλη επιλογή για τη βελτίωση των αποτελεσμάτων της θεραπείας PRP και PPP για την αναγέννηση των σκελετικών μυών είναι η επιλεκτική αφαίρεση των γηρασμένων κυττάρων με σαρωτές γήρανσης.Δεν υπάρχει αμφιβολία ότι τα πρόσφατα ερευνητικά αποτελέσματα σχετικά με την επίδραση του PRP στη γήρανση και τη γήρανση των κυττάρων είναι συναρπαστικά, αλλά βρίσκονται ακόμα στο αρχικό στάδιο.Ως εκ τούτου, δεν είναι λογικό να κάνετε οποιεσδήποτε προτάσεις αυτή τη στιγμή.

(Τα περιεχόμενα αυτού του άρθρου ανατυπώνονται και δεν παρέχουμε καμία ρητή ή σιωπηρή εγγύηση για την ακρίβεια, την αξιοπιστία ή την πληρότητα των περιεχομένων που περιέχονται σε αυτό το άρθρο και δεν φέρουμε ευθύνη για τις απόψεις αυτού του άρθρου, παρακαλούμε κατανοήστε.)